不同細胞用不同的培養(yǎng)液。此時，就不得不提起培養(yǎng)基里的“四大金剛”—MEM、DMEM、1640、F-12，它們基本參與了90%以上種類細胞的培養(yǎng)過程。

細胞生長的空間密度是細胞培養(yǎng)的關鍵。具體養(yǎng)細胞時應該摸索細胞喜歡的生長空間密度，也不能讓細胞濃度低于1~5×105個/mL而導致“孤獨死”。

當培養(yǎng)的貼壁細胞形態(tài)不好時，可在傳代時，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清都可以）洗滌一次，用滴管吸走，再加入3ml培養(yǎng)基，沿著瓶底輕輕吹打一遍，然后吸走。按時間點觀察直至找到細胞完美的形態(tài)為止。

至于在培養(yǎng)瓶中加入多少培養(yǎng)基量，則需要實驗汪們自己去摸索的。對于生長快的細胞，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基，細胞形態(tài)會更好，但是要注意對換液時間的把握。一般，生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài)，那么采用塑料瓶會比玻璃瓶的效果好。

細胞凍存時，蓋子要擰緊，不然復蘇水浴時會滲水，造成細胞污染。且每支凍存管都要標上細胞的名稱、凍存時間，并記錄在冊，以免后續(xù)復蘇細胞時，取錯細胞。

細胞凍存時要嚴格進行梯度降溫（-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮）。要知道冰火兩重天的生活環(huán)境只會讓嬌弱的細胞自爆身亡，謹記：緩降溫！

細胞解凍時，由于凍存管管壁較厚、隔熱，而導致水浴時間太長（2min還沒融化）時，可以將水浴鍋的溫度調至40℃左右，可以縮短解凍時間。

提前預定超凈臺，減少復蘇后插在冰盒里等待的時間，可避免細胞房人滿為患，超凈臺使用緊張，復蘇1h后，還沒有加入新的培養(yǎng)液。

復蘇細胞時一定要有耐心，因為有些細胞在復蘇一星期后才會真正有起色。因而，盡管細胞在復蘇三四天后沒有任何動靜，也不要輕易倒掉所有細胞，要耐心等待，兩周后再做決定。